离心类型

  1. 差速造粒(差速离心)
  • 这是**常用的离心方式。
  • 在包含缓冲液的蔗糖溶液中,将组织(例如肝脏)在32度下均质化。
  • 然后将匀浆置于离心机中,并在恒定温度下以恒定离心力旋转。
  • 一段时间后,在离心机底部形成沉淀物,称为沉淀,上方的溶液称为上清液。
  • 然后将上层溶液置于另一个离心管中,然后在进行的步骤中以更高的速度旋转。
  1. 密度梯度离心
  • 这种离心主要用于纯化病毒,核糖体,膜等。
  • 通过将较低浓度的蔗糖轻轻覆盖在离心管中的较高浓度上来创建蔗糖密度梯度
  • 将感兴趣的颗粒置于超速离心机的梯度和离心机顶部。
  • 颗粒穿过梯度,直到达到其密度与周围蔗糖的密度相匹配的点。
  • 除去级分并分析。
  1. 速率-区域密度-梯度离心
  • 带状离心也称为带式或梯度离心
  • 它依赖于沉降系数的概念(即,沉积物在液体介质中的运动)
  • 在这种技术中,在底部具有蔗糖且高密度的试管中创建了密度梯度。
  • 将蛋白质样品放在梯度的顶部,然后离心。
  • 通过离心,样品中沉降速度更快的颗粒将移至较慢的颗粒之前,即样品以梯度区域分开。
  • 蛋白质沉淀物根据其沉淀系数和馏分通过在试管底部创建一个孔来收集。
  1. 等速离心
  • 将样品与梯度形成溶液一起装入试管中(在预先形成的梯度之上或之下,或与自形成梯度混合)
  • 生物样品和铯盐的溶液均匀地分布在离心管中,并在超速离心机中旋转。
  • 在离心力的影响下,铯盐从顶部到底部重新分布以形成密度梯度。
  • 粒子移动到其浮力密度等于梯度的那部分并形成带的位置。也就是说,样本分子移动到其密度等于梯度密度的区域。
  • 这是一个“真正的”均衡程序,因为它取决于弹性密度而不是速度