分析离心

分析离心是一种分离方法,其中样品中的颗粒根据其密度和所经历的离心力进行分离。分析超速离心(AUC)是一种用于定量分析溶液中大分子的通用且可靠的方法。

分析离心原理

  • 分析离心是基于这样的原理,即比其他颗粒更稠密的颗粒沉降得更快。同样,较大的分子在离心力作用下比较小的分子运动更快。
  • 用于确定大分子的相对分子质量的分析超离心可以通过沉降速度方法或沉降平衡方法进行。
  • 大分子的水动力特性通过其沉降系数来描述。它们可以根据特定生物分子的浓度边界在重力场中移动的速率来确定。
  • 沉降系数可用于表征随着实验条件的变化大分子的尺寸和形状的变化。
  • 三种光学系统可用于分析型超速离心机(吸光度,干涉和荧光),可以实时**,选择性地观察沉淀。

 分析离心的步骤

  • 将少量样品(20-120 mm 3)放入分析池中,放置在超速离心机内。
  • 然后操作超速离心机,使得离心力引起随机分布的生物分子从旋转中心径向向外迁移穿过溶剂。
  • 分子距中心的距离是通过Schlieren光学系统确定的。
  • 从溶质浓度对距旋转中心的径向距离的平方绘制图,据此确定分子质量。

分析离心的用途

  • 分析离心可用于测定大分子的纯度。
  • 它也可以用于检查超分子复合物分子量的变化。
  • 此外,它可以确定天然状态下的溶质的相对分子质量。