差速离心概述

差速离心是一种离心过程,其中通过施加一系列增加的离心力将组分分别沉降到离心管中。

差速离心原理

  • 差异离心是基于不同大小和密度的生物颗粒沉降速率的差异。
  • 当施加增加的离心力时,较大分子的初始沉淀发生。
  • 取决于单独离心步骤的速度和时间以及颗粒的密度和相对尺寸,其他颗粒沉降下来。
  • **大种类的颗粒在离心管底部形成沉淀,在上清液中留下较小尺寸的结构。
  • 因此,较大的分子以较低的离心力快速沉降,而较小的分子则需要较长的时间和较高的力。
  • 如果颗粒的密度小于介质密度,则颗粒将漂浮而不是沉降。

差速离心的步骤

  • 将样品溶液在含有缓冲液的培养基中匀浆。
  • 然后将样品放入离心管中,该离心管在特定温度下以特定离心力运行特定时间。
  • 在该操作结束时,将在管的底部形成沉淀,将其与上清液分离。
  • 将上清液添加到新的离心管中,在该离心管中以另一种速度离心特定的时间和温度。
  • 再次,将上清液与形成的沉淀分离。
  • 继续这些步骤,直到所有颗粒彼此分离。
  • 然后可以通过测试特定颗粒**的指示剂来识别颗粒。

差速离心的用途

  • 差速离心通常用于分离细胞中发现的细胞器和细胞膜。
  • 它还可以用于核的低分辨率分离。
  • 由于此技术可根据颗粒大小分离颗粒,因此可用于纯化含有较大尺寸杂质的提取物。