速率-区域密度梯度离心/移动区离心

速率-区域密度梯度离心是一种将颗粒根据其形状作为大小进行分离的离心方法,并按照相同的密度梯度离心原理进行工作,但工作方式不同。也称为移动区离心。

速率-区域密度梯度离心原理

  • 速率区域离心法将颗粒按大小和形状分级。
  • 该程序是在预先浇注的密度梯度上方的限制区域内分层放置样品。然后将密度梯度离心。
  • 所有颗粒都迁移到密度梯度中,因为密度梯度的密度仅比要离心的颗粒的密度低得多。
  • 颗粒主要通过尺寸和形状分级。颗粒越大,沉淀越快。
  • 颗粒的球形对称性越高,其沉降速度就越快。
  • 颗粒以其沉降系数的函数的速率通过梯度沉降。
  • 与差速离心不同,在样品的整个区域中都分布有样品,在速率区域离心中,样品**初仅以梯度形式出现在梯度的顶部。

速率-区域密度梯度离心的步骤

  • 在施加样品之前,在离心管中制备密度梯度。
  • 然后将它们以带的形式分层放置在渐变的顶部。
  • 在离心过程中,快速移动的颗粒(较大的尺寸和圆形的形状)先于较慢的颗粒移动,以便将不同的颗粒分离为梯度的不同部分上的不同谱带。
  • 颗粒根据其沉降系数进行分离,并从管的底部通过穿孔获得颗粒。

速率-区域密度梯度离心的用途

  • 速率分区差速离心已用于分离病毒,因为它们具有每种病毒独特的大小和密度不同的成分。
  • 该方法已经用于在蔗糖梯度上分离RNA。
  • 此外,速率-区域差速离心也已用于从病毒和细菌中分离,纯化和分离DNA分子。
  • 多核糖体和核糖体亚基的分离一直是该方法的**早应用之一。